(1)使用前锅内加入适量清水至止水线。用开过的热水为宜，既可防止水垢的积存，也可缩短灭菌时间。
(2)将待灭菌的物品放入锅内，不要太紧密，以免影响蒸汽的流通和灭菌效果。物品也不要靠近锅壁，以免冷凝水顺银壁流入物品中。
(3)开启排汽阀，加热，自开姑产生蒸汽后3-5min再关紧排汽阀，此时蒸汽已将锅内的冷空气出排气孔排尽.让温度随蒸汽压力增高而上升。待压力逐渐上升至所需压力时，控制热源，维持灭菌所需时间。一般控制在1kg/c㎡，即1.034×10^5Pa，灭菌20min。
(4)灭菌结束，关闭热源，当压力降至0时，应立即开启锅盖，取出物品，不要久放。防止水蒸气凝结在锅盖和四壁上形成水滴，落到灭菌的物品上，弄湿包装纸，加大火菌物品的染菌可能性。
(5)灭商店可抽少数培养基置于37℃恒温箱内24h，若无菌生长可保存备用。斜面培养基从锅内取出趁热摆成斜面，凝固后再置于37℃恒温箱内24h，若无菌生长即可保存备用。
2.全自动高压蒸汽灭菌器使用的技术要求
(1)首先检查调节水箱命的水线，该水位线应该位于水箱的高水位。
(2)检查灭菌器底部的水位，该水位线应该刚刚没过底部;接通电源，此时，显示屏开始闪烁表水电源接通。同时确认蒸汽排放阀处于关闭状态。
(3)将待灭菌的物品放入灭菌器内，向左推动横梁，横梁必须全部推入左立柱内，顺时针转动把手，使锅盖向下压紧锅体，加力使之允分密合。
(4)选择灭菌程序，全自动高压蒸汽灭菌锅灭菌程序有两种方式。即手动灭菌程序、自动灭菌程序。通过操作面板上的按钮设定灭菌的温度和时间。
(5)按下开始键开始工作，此时，显示屏将会不断闪烁，当灭菌器内的温度达到 80℃以上时，显示屏开始显示天菌器内的实际温度.当温度超过100℃后，显示屏上的压力表指针开始指示灭菌器内的实际压力。当达到设定温度后，系统就会自动调节容器内的压力和温度并持续至预定时间。
(6)物品灭菌后需要迅速干燥，须打开安全阀或将排汽排水总阀向左旋转车“开” 位置，让灭菌器内的蒸汽迅速排出，使物品上残留水蒸气快速蒸发。但灭菌液体时严禁使用干燥方法。
(7)灭菌结束后，检查确认腔内无压力后，可以逆时针转动把手开门取出灭菌物品，送入灭菌物品存放室。